初榨葡萄籽油对改善高脂膳食小鼠脂代谢的影响.doc

初榨葡萄籽油对改善高脂膳食小鼠脂代谢的影响长期高脂膳食会诱导机体脂代谢紊乱和氧化还原状态失衡,进而产生一系列和脂代谢紊乱相关的慢性疾病,比如肥胖、心血管疾病、2型糖尿病等。初榨葡萄籽油富含多不饱和脂肪酸、V_E(生育酚和生育三烯酚)、植物甾醇、角鲨烯、多酚等功能活性成分,成为食用植物油研究的最热点的话题。研究表明初榨葡萄籽油具有抗氧化、降血脂、抗衰老、抗癌等生理作用,但关于初榨葡萄籽油对调节生物体内的生理功能的作用机制尚需深入研究。本文旨在控制能量摄入一致的前提下,探究初榨葡萄籽油对改善高脂膳食小鼠脂代谢调节的影响,对进一步加大葡萄籽资源的综合应用具有深远的意义。首先,满足能量摄入保持一致的前提下,将高脂饲料中的油脂全部替换为猪油、玉米油和初榨葡萄籽油,初步探究全替换初榨葡萄籽油对改善小鼠脂代谢紊乱的影响。36只C57BL/6J雄性小鼠随机分成3组:猪油组(Lard组);玉米油组(CO组);初榨葡萄籽油组(GSO组)。饲养期间分别测定小鼠葡萄糖耐量和胰岛素耐量。小鼠处死后,分别取小鼠的血清和肝脏,观察肝脏切片,测定小鼠血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C、FFA含量以及肝组织ALT和AST活力。结果表明:和Lard组相比,GSO组小鼠的最终体重和体重增长量分别减少了8.3%和18.3%;血清中的TC、TG、LDL-C、FFA含量以及肝脏中的ALT和AST活力均有显著性的降低(p<0.05)。此外,全替换的初榨葡萄籽油可以显著改善小鼠葡萄糖耐量和胰岛素耐量(p<0.05)。肝脏形态学结果显示全替换的初榨葡萄籽油可以显著地降低肝脏脂肪的沉积,减少脂肪细胞的大小(p<0.05)。其次,能量摄入保持一致的前提下,高脂饲料中的猪油成分保持不变,将植物油脂成分分别替换成猪油、玉米油和初榨葡萄籽油,探究部分替换的初榨葡萄籽油对改善高脂膳食小鼠脂代谢紊乱的影响。48只五周龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为4组:正常对照组(ND组),玉米油组(CO60%组),初榨葡萄籽油组(GSO60%组),猪油组(Lard60%组)。每周检测小鼠的体重,饲养期间测定小鼠葡萄糖耐量、胰岛素耐量、空腹血糖以及小鼠的能量代谢状态。小鼠处死后,分别取小鼠的血清、脂肪和肝脏,观察肝脏切片,测定小鼠血清中的生化指标,肝脏中的抗氧化指标,ELISA法测定小鼠肝脏炎症因子和脂肪组织中瘦素和脂联素指标,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析小鼠肝脏中的PPAR-α、ACC-1、FAS、SREBP-1c、SCD-1和ACOX-1基因的表达,脂肪组织炎症因子IL-6、TNF-α和MCP-1基因的表达。结果表明:和Lard60%组相比,GSO60%组小鼠的体重以及体重增量分别减少了6.22%和12.97%;呼吸交换率(RER)、能量消耗、自主活动量、葡萄糖耐量和胰岛素耐量均有显著性的提高(p<0.05);血清中TC、TG、LDL-C、FFA、胰岛素、胰高血糖素以及全血中的糖化血红蛋白水平均有显著性的降低(p<0.05);肝脏中的CAT、SOD、GSH-PX活力显著性地升高(p<0.05),MDA活力显著性地降低(p<0.05);肝脏炎症因子IL-6和TNF-α水平显著性地降低(p<0.05);脂肪组织中瘦素水平显著性地降低(p<0.05),脂联素水平显著性地升高(p<0.05)。肝脏HE染色和油红O染色结果表明部分替换的初榨葡萄籽油可以一定程度地改善高脂膳食小鼠肝细胞损伤,降低肝脏脂肪的沉积,减少脂肪细胞的大小。RT-qPCR实验结果显示部分替换的初榨葡萄籽油可以上调小鼠肝脏中PPAR-α基因的表达,下调ACC-1、FAS、SREBP-1c基因以及脂肪组织炎症因子IL-6、TNF-α和MCP-1基因的表达。最后,初步探究初榨葡萄籽油的脂肪酸、不皂化物和多酚对改善高脂饲料小鼠脂代谢紊乱的影响。45只C57BL/6J雄性小鼠随机分为5组:猪油组(Lard),精炼葡萄籽油组(GSE),精炼葡萄籽油和不皂化物组(GSE+UN),精炼葡萄籽油和多酚组(GSE+PO),精炼葡萄籽油、不皂化物和多酚组(GSE+UN+PO)。实验期间测定小鼠的糖耐量和空腹血糖,小鼠处死后测定小鼠血清中TC、TG、ALT、AST以及胰岛素水平。结果表明:和Lard组相比,初榨葡萄籽油中的不饱和脂肪酸、不皂化物和多酚功能成分均能有效地改善高脂膳食小鼠的体重,减少肝脏脂肪的堆积,降低小鼠血清TC、TG和胰岛素水平。此外,初榨葡萄籽油不皂化物和多酚成分还可以有效地改善小鼠的糖耐量,不皂化物在改善小鼠脂代谢紊乱作用效果要强于多酚。