贝伐珠单抗治疗结直肠癌的作用及耐药机制.doc

贝伐珠单抗治疗结直肠癌的作用及耐药机制研究背景:贝伐珠单抗已经证明能够抑制结肠癌的生长,已经成为晚期结直肠癌患者的常用靶向治疗药物之一,但贝伐珠单抗最终会产生耐药,影响了其长期应用。目前的研究显示贝伐珠单抗耐药主要涉及肿瘤微环境的改变、其他血管生成通路激活及免疫抑制等机制,但确切的耐药机制仍未完全阐明。研究目的:本课题进一步研究贝伐珠单抗对结肠癌的抑制作用,探讨结肠癌耐受贝伐珠单抗的机制。研究方法:通过建立结肠癌裸鼠移植瘤模型,应用贝伐珠单抗治疗移植瘤,观察移植瘤体积及生长速度的变化,并收集移植瘤组织。提取第一次经贝伐珠单抗治疗过的移植瘤,建立原代细胞,体外培养后再接种裸鼠,建立第二次移植瘤模型;再用贝伐珠单抗进行治疗,观察移植瘤的生长。收集治疗后的移植瘤,进行免疫组化染色,检测相关的耐药基因的表达。并选取相关高表达的基因,进行深入的机制研究。研究结果:贝伐珠单抗第一次治疗可以显著抑制结肠癌移植瘤的生长。发现对应用贝伐珠单抗第一次治疗后的移植瘤细胞再接种建立的第二代移植瘤,贝伐珠单抗仍能抑制其生长,显著抑制了肿瘤的血管生成。这些结果,提示贝伐珠单抗对其治疗过的肿瘤依然有效,单次治疗并不能诱导贝伐珠单抗耐药,贝伐珠能够重复应用治疗结肠癌。免疫组化染色结果显示,经过贝伐珠单抗治疗的移植瘤Survivin的表达随着治疗时间延长而逐渐增高,提示Survivin可能与结直肠癌对贝伐珠单抗的耐药有关。同时我们建立了Survivin高表达稳定转染细胞株,为了进一步研究Survivin在贝伐珠单抗耐药中的作用奠定了基础。结论:贝伐珠单抗对其治疗后的移植瘤仍然有效。单次贝伐珠单抗治疗不足以诱导稳定耐药的动物模型,可能需要对贝伐珠单抗治疗后移植瘤多次接种反复治疗才能得到稳定的耐药动物模型。Survivin在贝伐珠单抗耐药中的作用需要进一步证实。