谷子愈伤诱导优化及转化影响因素分析.doc

谷子愈伤诱导优化及转化影响因素分析谷子(SetaritalicaL)起源于中国,是世界上最古老的农作物之一,具有抗逆性强、适用性广、营养丰富等特点在我国的北方粮食生产中占有重要的地位。谷子是二倍体自花授粉作物,其基因组小(约470Mb)而且非常稳定,非常适合作为基因组研究对象。但是谷子是区域性重要作物,多在发展国家和欠发达国家种植,研究经费投入少,造成谷子基因组和生物技术方面的研究相对滞后于其它主要作物。随着世界人口的不断增长,对粮食的需求量也相应增加,这就需要通过基因工程技术,利用优质、高产等基因资源来提高谷子的品质和产量。而建立一套高效、优良的谷子转化和再生体系是基因工程方法选育、改良谷子品种、提高产量的前提。本试验采用谷子幼穗和不同谷子品种茎尖作为外植体进行愈伤诱导,分析了影响茎尖愈伤形成的因素并对诱导条件进行优化。在幼穗的愈伤诱导中,形成的愈伤组织质地紧密且成白色颗粒状结构,但在分化培养基中愈伤形成的绿芽没有进一步的生长和分化,未获得再生植株。茎尖作为外植体进行愈伤诱导中,将不同品种的谷子分别转移到三种2,4-D浓度的诱导培养基上,结果表明2,4-D的浓度对谷子愈伤形成有着重要影响,且不同品种的谷子对2,4-D的敏感度不同。试验分析了Zn和Kn两种细胞分裂素对谷子茎尖愈伤形成的影响,结果证明Kn比Zn较为适合谷子的愈伤形成。糖类作为培养基的基本碳源,对茎尖愈伤的形成也有一定影响,数据显示蔗糖相较于葡萄糖更为适合谷子愈伤的形成。此外实验对谷子的初级愈伤和胚型愈伤进行了农杆菌转化,并进行GUS染色分析,试验结果显示初级愈伤较之胚型愈伤对农杆菌的接受能力高。本研究用茎尖做外植体不受季节和地域的限制,试验结果为今后谷子组织培养植株再生和农杆菌介导的遗传转化研究提供了参考数据。