粘接树脂材料细胞毒性的体外评价.doc

粘接树脂材料细胞毒性的体外评价目的:评价ParaCore粘接树脂/ParaBond牙本质粘接剂作为根管充填材料时的体外细胞毒性。方法:选取ParaCore粘接树脂、ParaBond牙本质粘接剂、牙胶、AHPlus根管封闭剂作为实验样本,各样本在材料固化后于37℃培养箱内分别放置1天(新鲜组)和7天(陈旧组)后,制取其浸提液,每种材料分别制成100%、50%、25%、12.5%四种稀释液,与小鼠L-929成纤维细胞接触培养24h,采用二甲基噻唑二苯基四唑嗅盐(bromide3-(4,5dimethylthiazol-2yl)-2,5-diphenyltetrazolium,MTT)比色法,用酶联免疫检测仪于波长490nm处测各组光密度值(opticaldensityvalue,OD值),计算各实验组的细胞相对增殖率(relativegrowthrate,RGR),并进行统计分析。结果:1.L-929成纤维细胞的形态学观察结果:在ParaCore、ParaBond和牙胶材料组中,新鲜组与陈旧组的细胞数量与形态变化差异不大;AHPlus组细胞变化明显。ParaCore组细胞形态正常,与阴性组相似,贴壁生长旺盛,为梭形或多边形,细胞折光性强,胞内结构清晰,可见圆形分裂细胞。ParaBond和牙胶组细胞变圆,胞浆内有许多颗粒状物质,细胞崩解;但是AHPlus的新鲜组与陈旧组差异明显,新鲜组的细胞脱壁,凋亡崩解,胞浆内颗粒状物质增多,陈旧组的细胞形态正常,细胞量增多。2.新鲜组4种浓度稀释液中,ParaCore组细胞RGR大于牙胶组,ParaBond组细胞RGR小于AHPlus组,且差异均有统计学意义(P<0.05);随着浸提液浓度增大,细胞RGR降低。ParaCore、ParaBond和AHPlus组的4种浓度的RGR两两比较均有统计学差异(P<0.05)。3.陈旧组4种浓度的稀释液中,ParaCore组细胞RGR大于牙胶组,除25%浓度外,两者之间均有统计学差异(P<0.05);ParaBond组细胞RGR小于AHPlus组,在100%、50%浓度中,两者之间有统计学差异(P<0.05);随着浸提液浓度增大,细胞RGR降低。除AHPlus组外,其他三种材料的四种浓度的RGR差异均有统计学意义(P<0.05);进一步LSD-t检验显示,ParaCore组在100%浓度与12.5%浓度、50%浓度与12.5%浓度,差异有统计学意义(P<0.05);牙胶组除50%浓度与25%浓度、25%浓度与12.5%浓度外,差异均有统计学意义(P<0.05);ParaBond组除25%浓度与12.5%浓度外,差异均有统计学意义(P<0.05)。4.材料放置时间越长,细胞RGR越大。除了牙胶组,其他3种材料的新鲜组与陈旧组的细胞RGR均有统计学差异(P<0.05)。结论:ParaCore粘接树脂的细胞毒性低于牙胶,ParaBond粘接剂的细胞毒性高于AHPlus封闭剂。4种材料的细胞毒性具有浓度依赖性。除了牙胶,其他3种材料的细胞毒性随时间延长而降低。