海带中岩藻黄素及其异构体的分离与生物活性研究.doc

海带中岩藻黄素及其异构体的分离与生物活性研究近年来,我国对海洋资源的开发利用越来越重视,提高海洋资源加工水平迫在眉睫。传统的海带产业中,多以提取褐藻胶为主,海带色素等脂溶性物质多作为废料遗弃。岩藻黄素作为海带中类胡萝卜素的主要成分,具有良好的生物活性。目前已被食品、化妆品、药品等行业广泛关注,具有良好的商业前景与商业价值。本实验以海带为原材料,采用乙醇提取海带中的色素,验证了使用大孔树脂富集岩藻黄素的可行性。结果表明大孔树脂X-5对岩藻黄素有较强的吸附作用,考察了使用乙醇和水作为洗脱剂对岩藻黄素的洗脱作用,结果表明60%以上的乙醇的水溶液能有效洗脱大孔树脂吸附的岩藻黄素。建立了实验室通过减压柱层析快速富集富含岩藻黄素组分的方法,富集组分先通过硅胶柱层析纯化,最后用高效制备液相色谱法制备得到三种岩藻黄素的异构体。岩藻黄素及其异构体通过紫外可见光谱（UV–VIS）、核磁共振氢谱（¹H-NMR）和质谱（MS）进行结构表征和鉴定。采用乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞系为模型,对岩藻黄素的体外抗肿瘤活性进行了评价。结果表明,岩藻黄素显著抑制乳腺癌细胞的增殖,13-顺和13’-顺岩藻黄素组分对癌细胞具有最强的抑制活性,IC₅₀值达到23.71μg/mL。全反式岩藻黄素和9’-顺岩藻黄素两种异构体IC₅₀值分别为45.30μg/mL和27.09μg/mL。qPCR试验表明岩藻黄素各异构体可能通过抑制癌细胞NF-κB家族基因表达而抑制乳腺癌细胞增殖。考察了岩藻黄素异构体的自由基清除活力,其中全反式岩藻黄素清除DPPH自由基活性较高,13-顺和13’-顺岩藻黄素组分对羟基自由基表现出较强清除能力,全反式岩藻黄素和13-顺和13’-顺岩藻黄素组分对超氧自由基的清除能力要高于9’-顺岩藻黄素。