巴豆中佛波醇提取纯化工艺优化研究.doc

巴豆中佛波醇提取纯化工艺优化研究目的：建立巴豆油中佛波醇(Phorbol)的含量测定方法。用HPLC法测定佛波醇的含量,并通过正交法优化巴豆油水解条件。并对佛波醇进行提取分离和纯化。方法：水解巴豆油,用HPLC法测定水解后佛波醇的含量。色谱柱为KromasilC8(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇：水=20：80,流速为1.0mL/min,柱温为25℃,检测波长为234nm。通过萃取,硅胶过柱和重结晶等方法分离纯化,并对萃取溶剂和过柱条件和方法进行研究,优化工艺,以适宜实际工业生产。结果：在46.8～468μg/mL范围内佛波醇浓度与峰面积线性关系良好,回归方程为Y=9820.8X+50238,r=0.9999；回收率为96.73%,RSD为0.96%。巴豆油的优化水解条件：温度20℃,料液比8倍,水解3h,此条件下佛波醇的产率最高,平均产率为2.41%。采用石油醚萃取,减压过柱,石油醚-乙醇体系梯度洗脱,重结晶等方法分离纯化,得到375.3mg佛波醇结晶,纯度为98.78%,得率为34.62%。结论：所建HPLC方法易于操作、结果稳定、重现性好,检测成本低,可用于巴豆油中佛波醇的含量测定。水解条件具有水解时间短,易于操作等优点。分离纯化工艺方法简单,成本低廉且分离操作时间短。