低温对小鼠视网膜光损伤的保护作用研究.doc

低温对小鼠视网膜光损伤的保护作用研究目的:研究低温对小鼠视网膜光损伤的保护作用及其机制方法:1.建立小鼠视网膜光损伤模型:采用白色荧光灯(LED)作为光源,平均光照强度为12000Lux,照射时间为12小时,并在光照后第五天测量f-ERG。2.建立小鼠低温模型:将小鼠放置于8°C的恒温冰箱内,3小时。低温处理后立即使用温度计测量小鼠的肛温,肛温代表小鼠核心温度。3.检测小鼠的视觉电生理:在实验的第5天,分别检测四组小鼠的双眼f-ERG。实验分组及处理如下:选取健康C-57雄性小黑鼠32只(每组8只),并将其随机分成4组:正常组、光照组、低温组和光照低温组;正常组小鼠于常规环境下饲养;在实验的第一天将光照组和光照低温组放置于12000Lux的光照强度下12h;在实验的第1、2、3天将低温组和光照低温组小鼠暴露于8°C的恒温冰箱内,3小时。4.Westernblot检测视网膜组织中的蛋白:从四组动物中提取视网膜组织蛋白,并测量CIRBP、Parp的表达量。5.视网膜厚度的测量:通过制备小鼠眼球组织切片,测量视网膜组织各层厚度。结果:1.光损伤条件下,与光照组比较,光照低温动物组的f-ERG的b波和a波的波幅明显升高,差异具有统计学意义(p<0.05)。2.Westernblot检测视网膜组织中蛋白含量,与光照组相比,光照低温组CIRBP表达量上升,而Parp表达量下降。3.视网膜组织切片显示,与光照组相比,光照低温动物组的ONL和PS层厚度增加。结论:1、低温在小鼠视网膜中具有对抗光损伤的作用。2、在动物视网膜中,低温通过促进冷休克蛋白的过表达,以及抑制Parp的过表达对抗视网膜光损伤。3、在视网膜组织切片中,低温阻止了由光损伤引起的视网膜各层厚度的减少,尤其是PS层和ONL层。