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本发明公开了一种高速无伪影超分辨结构光照明显微成像方法,包括:1)产生条纹状照明光场;2)利用条纹状照明光场分别在不同的条纹方向以及不同的相移步数下照明并激发待测样品产生荧光信号;3)采集荧光信号,获得由不同的条纹状照明光场激发的原始荧光图像;4)利用高速无伪影重建算法处理原始荧光图像,获得超分辨图像。本发明可以大幅抑制超分辨结构光照明显微图像中的计算伪影,显著提高超分辨图像的保真度;同时还具备毫秒级别的重建速度,为实时成像提供了极大的便利。该方法可以为实现高保真、实时的超分辨显微成像提供一种有力的手段。