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液相色谱原理应用经典液相色谱应用领域液相色谱系统:总体设计ThermoUltiMate3000仪器配置梯度泵独特的柱温箱可放置两个柱切换阀色谱分离过程3631-5,色谱的分离度分离度方程基础理论:塔板理论concen25选择因子对分离度的影响选择液相色谱的检测器荧光检测器原理多环芳烃(PAH)示差折光(RefractiveIndex)检测•示差折光检测器(RI)是第一个商品化的液相色谱检测器(上世纪六十年代末、七十年代初)•通常被认为是一种通用检测器•检测溶液中所有被溶解的溶质-非特异性•任何光学介质的折光率都被定义为光在该介质中与真空中的速度之比值蒸发光散射(ELSD)原理10不同类型色谱选择性差异不同品牌C18区别各种不同的混合基质制作方式苯胺2mAUce[mAU]Absorbanc粘度曲线样品溶剂对分析的影响•样品溶剂洗脱能力须等于或小于流动相初始洗脱能力[mAU]Absorbance流速对分析结果的影响柱温对分析结果的影响方法优化—离子抑制方法优化—离子抑制方法优化—离子对容量因子e[mAU]Absorbance三聚氰胺—反相C18柱离子对方法12.6531-液相色谱的方法建立-三聚氰胺分析SCX强阳离子交换色谱柱-离子交换方法(实例5a)aminemela梯度的洗脱方式•高压梯度及低压梯度梯度方法开发-优化溶剂梯度对下列每种情况,您认为使用哪种梯度曲线能改善分离?梯度坡度对分析的影响流动相缓冲液pH值从pH4.95到pH4.45递减时,氨基酸衍生物的保留和分离呈2种变化趋势非常感谢各位同学!