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本发明公开了具有改善免疫应答作用的软骨提取物、其制备方法及其用途。本发明的软骨提取物是以动物软骨为原料,通过加入质量比为4:1至1:1的透明质酸钠与香菇多糖,得到含有对于改善免疫应答为有效量的未变性II型胶原蛋白的软骨提取物,能够同时防止所述软骨提取物在贮存期间的微生物腐败和II型胶原蛋白的变性,从而提高了产品的安全性和耐贮性。本发明的所得软骨提取物具有安全性高、有效性强等优点,具有改善免疫应答、提高血清抗炎因子如TGF?β的含量、同时降低炎症因子如TNF?α的含量的作用,因此可作为食品原料添加到保健食品或功能性食品中。