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东北藜蒿提取物体外抗菌作用的初步研究论文【ABSTRACT】Objective:ToinvestigatetheantibacterialfunctionofArtemisiaselengensisturczextractinnortheastchinainvitro.Methods:Thetubebrothmethodswereusedtodetermintheminimalinhibitionconcentration(MIC)for13commonbacteriastrains.Results:ItwasshownthatChineseMedicineinnortheastchinaexerteddifferentantibacterialeffectsonthe13commonbacteriastrains.Conclusion:ArtemisiaselengensisTurcz.innortheastchinaholdsantibacterialeffectsoncommonpathogensinvitro.【KEYWORDS】ArtemisiaselengensisTurcz,TheMinimalInhibitionConcentration,MicrobialSensitivityTests藜蒿为菊科植物，又称蒌蒿，在我国主要生长在鄱阳湖一带，东北、华北和中南地区均有野生分布，含有丰富的人体必需的微量元素［1］。远在唐代，孙思邈就记载了藜蒿的药用价值“藜蒿性平，味甘辛”,具有健体补虚、清心解毒、利胆退黄作用，主治肝胆湿热、脾虚纳滞等病症。近年来研究表明藜蒿提取物具有降压作用［2］，也有少量报道其有不同程度抑菌作用［3］。为了开发藜蒿的药用资源，为临床应用提供科学依据，我们对东北藜蒿的体外抗菌作用进行了初步研究。1材料与方法1.1一般资料1.1.1药材干燥藜蒿原植物产于东北。1.1.2菌种乙型副伤寒沙门菌，铜绿假单胞菌，大肠埃希菌，表皮葡萄球菌，痢疾志贺菌，鲍曼不动杆菌，嗜麦芽假单胞菌，肺炎克雷伯氏菌，金黄色葡萄球菌，变形杆菌，而茎平滑念珠菌，热带念珠菌，白色念珠菌，均购自北京生物制品检定所。1.1.3培养基1.1.3.1液体培养基Mueller-Hinton(MH)肉汤。1.1.3.2固体培养基Mueller-Hinton(MH)琼脂，沙氏培养基。1.1.4仪器721分光光度计，培养箱，无菌超净工作台。1.2方法1.2.1藜蒿水煎剂的制备中药煎制：参照陈奇的方法［4］进行，取藜蒿粉碎，加蒸馏水浸泡30min后加热煮沸。开始用强火，沸腾后改用文火，保持微沸30min至1h，搅拌、趁热过滤。药渣再加蒸馏水煮沸30min，滤过。合并滤液，浓缩成含生药2g/mL的药液，灭菌后备用。1.2.2藜蒿醇提物的制备参照陈奇的方法［4］进行，用60%乙醇提取，浓缩成含生药2g/mL的药液，灭菌后备用。1.2.3菌液的`制备1.2.3.1标准比浊管配制0.048mol/L(1.175%)氯化钡0.5mL,加0.18mol/L(1%)硫酸溶液99.5mL，混匀后用530nm波长比色调整其浊度，使吸收值为0.1。相当于5×(107～108CFU/mL)。其操作参考医学微生物学实验指导［5］。1.2.3.2实验菌液制备将实验所用13种菌的培养物（菌落）用无菌生理盐水制成菌液，浓度相当于0.5麦氏比浊。1.2.4藜蒿提取物（药液）的稀释藜蒿提取物采用试管稀释法［4］，每一组实验取试管5支，分别标记1、2、3、4、5，共13组，用MH肉汤（细菌）、沙氏液体（真菌）倍比稀释药液至待测的浓度，依次为1.5g/mL、1.0g/mL、0.5g/mL、0.25g/mL、0.125g/mL。另取3支试管作为对照管，分别标记为“MH肉汤对照”,“药物原浓度对照”,“测试菌生长对照”。1.2.5实验方法药液稀释好之后将13种实验菌液分别加入13组含药液培养基的试管中，除MH肉汤对照管外每管0.1mL菌液。所有试管放置温箱内37℃，培养24h后观察结果，在对照管符合要求的情况下，将各实验管的培养物接种至相应培养基的琼脂平板上，确定是否有细菌生长。37℃，24h观察结果，以琼脂平板上完全无细菌生长的药物最高稀释度为最低抑菌浓度（MIC）。2结果2.1东北藜蒿水煎剂对13种病原菌的最低抑菌浓度（MIC）见表1。表1东北藜蒿水煎剂对13种病原菌的最低抑菌浓度注：有病原菌生长“+”无病原菌生长“-”结果显示：东北藜蒿水煎剂对细菌和真菌均有不同程度的抑菌作用，对鲍曼不动杆菌抑菌作用较强，MIC为0.25g/mL。对真菌中热带念珠菌抑菌效果较好，MIC为1.0g/mL，重复性实验结果一致。2.2东北藜蒿醇提物对13种病原菌的最低抑菌浓度见表2。表3东北藜蒿醇提物对13种病