抗体噬菌体展示技术.ppt
胜利****实阿
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利用噬菌体展示技术筛选与BINOL相结合的抗体的综述报告噬菌体展示技术是一种先进的蛋白质工程技术,广泛应用于以抗体为代表的蛋白质的筛选、改良和优化。噬菌体(phage)是一种病毒颗粒,可以寄生在细菌表面,利用其表面上的受体与细菌结合,并把其基因物质注入细菌内部进行复制。在噬菌体展示技术中,抗体基因被插入噬菌体的表面展示基因中,因此被称为“噬菌体展示技术”。在这种技术的帮助下,研究者可以直接筛选出与特定抗原高度亲和的、特异性强的抗体,避免了传统筛选手段的局限性,具有高度的灵活性和效率。其中与BINOL(1,
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本发明提供一种ProteinA免疫噬菌体展示抗体库的构建方法,其步骤包括:(1)用ProteinA蛋白免疫公鸡,提取淋巴细胞的总RNA,逆转录成cDNA;(2)利用PCR技术扩增重链可变区和轻链可变区片段并拼接成scFv基因;(3)构建pCANTAB5E‑2sfi1‑scFv重组质粒,电转化至TG1感受态细胞,构建噬菌体单链抗体库;(4)特异性富集噬菌体单链抗体库,从中筛选出阳性克隆。本发明通过噬菌体展示抗体库技术筛选得到高亲和力的鸡源单链抗体,并将单链抗体转化为IgY形式,为ProteinA免疫检
噬菌体展示技术解析.doc
噬菌体展示技术解析噬菌体展示技术经过近20年的发展和完善,已被广泛应用于抗原抗体库的建立、药物设计、疫苗研究、病原检测、基因治疗、抗原表位研究及细胞信号转导研究等。噬菌体展示系统模拟了自然免疫系统,使我们有可能模拟体内抗体生成过程,构建高亲和力抗体库。由于噬菌体展示技术实现了基因型和表型的有效转换,使研究者在基因分子克隆基础上实现了蛋白质构象体外控制,从而为获取具有良好生物学活性的表达产物提供了强有力手段。另外,噬菌体展示技术已成为不经过免疫获取特异性人源抗体的新途径,为获取对人类和动物疾病有诊断和治疗价