一种应用琼脂基重金属吸附剂的甲硝唑测定方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108982884A(43)申请公布日2018.12.11(21)申请号201810609722.5(22)申请日2018.06.13(71)申请人苏州欧福蛋业股份有限公司地址215215江苏省苏州市汾湖高新技术产业开发区金家坝社区金贤路386号(72)发明人谢良朱建(51)Int.Cl.G01N33/94(2006.01)权利要求书1页说明书5页(54)发明名称一种应用琼脂基重金属吸附剂的甲硝唑测定方法(57)摘要本发明涉及食品检测领域，具体关于一种应用琼脂基重金属吸附剂的甲硝唑测定方法，本发明方法公开的一种应用琼脂基重金属吸附剂的甲硝唑测定方法，本发明是针对鸡蛋这个体系，利用市售的试剂盒检测鸡蛋的甲硝唑含量，其特征在于：本方法增加酶解操作和匀浆机一个装置，并使用一种琼脂基重金属吸附剂对残留的重金属进行吸附，可以提高测试的灵敏度和重现性。CN108982884ACN108982884A权利要求书1/1页1.一种应用琼脂基重金属吸附剂的甲硝唑测定方法，其技术方案如下：步骤一、取去壳鸡蛋样品、均质；称取均质后鸡蛋样品2g放置于干净离心管中，加入1mL1X样品提取液，然后加入0.1-0.5ml中性蛋白酶酶液(1.0%-1.5%)，先在40-50℃水浴30-50min，然后在85-95℃水浴处理5-10min；步骤二、向处理好的样品加入3.5-5.5mL的乙腈和0.15-0.35g的琼脂基重金属吸附剂，初步混匀，然后用高速匀浆机，于9000-10000rpm下匀浆40-60s；然后在20-25℃，使用3500-4000r/min的转速离心250-300s；步骤三、移取2mL上清液到一个新的离心管中，将溶剂除去，加入0.3-0.7mL样品稀释液和0.8-1.2mL正己烷溶解干燥物，最大速涡流40-60s，溶解均匀；然后在20-25℃，使用3500-4000r/min的转速离心250-300s；弃去上层正己烷，取50μL下层液作检测；步骤四、分别加入50μL的标准品和样品于各自所设定的孔中，在每孔中加入100μL1x酶标记物，轻敲微孔板边缘混匀40-60s；然后在20-25℃避光孵育45min；步骤五、洗板3次，每次加入250μL1×洗液，最后一次使板尽量甩干并在吸水纸上吸干；加入TMB底物100μl，轻敲微孔板边缘混匀40-60s，在20-25℃避光孵育30min，加入100μL的终止液终止反应；步骤六、用无绒布擦拭除去微孔底部的水分和指痕，尽快在450nm下读OD值。2.根据权利要求1所述的一种应用琼脂基重金属吸附剂的甲硝唑测定方法，其特征在于：步骤二所述的初步混匀的方法为使用最大速涡流2-6min或者用振荡器振荡8-15min。3.根据权利要求1所述的一种应用琼脂基重金属吸附剂的甲硝唑测定方法，其特征在于：步骤三所述的除去样品溶剂的方法为在60-70℃水浴减压旋转蒸发干燥或60-70℃水浴氮气吹干。4.根据权利要求1所述的一种应用琼脂基重金属吸附剂的甲硝唑测定方法，其特征在于：所述的琼脂基重金属吸附剂按照以下方案制备：按重量份计，在搅拌釜中加入硼酸琼脂糖层析介质100份，0.5-2份椰油酰水解玉米蛋白钾，0.5-2份菜油酰胺丙基环氧丙基二甲基氯化铵，0.5-2份蓖麻醇酸酰胺丙基甜菜碱，200-300份米糠酸，50-100份红花油酸，50-100份大豆油酸，0.5-2份膦酰基-吡哆亚基绕丹宁钠，1000-4000份水；升温至50-80℃进行反应；保温15-40h，再加入0.5-2份聚氧亚甲基蜜胺脲，0.5-2份硬脂基羟乙基咪唑啉氮鎓氯化物，50-80℃保温3-7h，再经过滤，水洗，干燥，得到琼脂基重金属吸附剂。5.根据权利要求4所述的一种应用琼脂基重金属吸附剂的甲硝唑测定方法，其特征在于：所述的pH值调节剂为10%-20%的甲酸溶液。2CN108982884A说明书1/5页一种应用琼脂基重金属吸附剂的甲硝唑测定方法技术领域[0001]本发明涉及食品检测领域，具体关于一种应用琼脂基重金属吸附剂的甲硝唑测定方法。背景技术[0002]鸡蛋是一种廉价的优质动物性食品，已经成为大众的生活必需品。一方面说明我国蛋鸡饲养业的发展速度快，在蛋鸡养殖和鸡蛋产品监控中，甲硝唑是一个重要的监控项目。[0003]CN106483183A提供一种甲硝唑的检测方法，属于甲硝唑的检测技术领域。本发明是将氨基功能化MCM-41采用滴涂到玻碳电极的方式制备成氨基功能化MCM-41修饰电极，利用三电极系统,采用方波伏安法检测甲硝唑。结果表明，氨基功能化MCM-41修饰电极差分脉冲伏安法检测不同浓度甲硝唑，峰电流随甲硝唑溶液浓度的增加而不断增大，甲硝唑的峰电流与甲硝唑浓度呈现良好的线性关系。[