高效液相色谱-仪器分析实验教案.pdf

仪器分析实验课程教案

实验名称：高效液相色谱混合物的定量和定性测定

实验类型验证性教学时数7每组人数8

一、实验目的及要求：

1．掌握高效液相色谱定性和定量分析的原理及方法；

2．了解高效液相色谱的构造、原理；
3．学习高效液相色谱仪的操作。

教学重点：

1、溶液配制的条件
2、色谱工作站参数的设定。
3、定量定性分析方法

教学难点：

(1)、学习高效液相色谱的使用方法、了解该仪器的结构；

(2)、定量定性分析方法

二、实验原理

高效液相色谱由储液器，泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成，储液
器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱内，
由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动，经过反复多
次的吸附—解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次
从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪。

三、主要仪器和试剂

主要仪器：安捷伦1260液相色谱仪，配有紫外检测器，PhenomenexODS柱]；1
自动进样器。

试剂：色谱纯甲苯、苯、丙酮、甲醇、超纯水；

未知样品1、2、3、4。

教学内容及过程
（一）检查实验预习报告
（二）上次实验存在的问题
（三）高效液相色谱操作
（四）实验内容及步骤

A、溶液配制
1配制标准系列溶液
三组分混标液：每mL溶液分别含5uL苯、甲苯和丙酮。
分别准确移取0、、、10.00和2mL甲醇中。
2流动相的配制、过滤和除气。
标准苯测试液。
未知样品1号、2号、3号和4号。
B、上机测定
1更换流动相。
2按操作规定开动仪器，排气后让色谱柱平衡（流动性为80%甲醇，速度1.0mL/min）。
3设置色谱工作站参数。
AgilentHPLC仪
色谱柱：
流动相：甲醇：水=8：2
流速：mL/min
检测波长：254nm
进样体积：10μL
4进样、采集色谱图。
1）三组分混标液
2）标准溶液系列
3）未知样品
5色谱数据分析，打印色谱图及分析报告。
6更换甲醇流动相，清洗色谱柱。
7关闭仪器。
（五）提问

1、高效液相色谱溶液配制需要注意哪些操作？

答：药品需要色谱纯的；配制好的溶液需要抽气处理——这步操作有些高效液相色谱能

自动完成。

2、利用高效液相色谱进行定量和定性分析的依据有哪些？

答：定性分析根据相同色谱系统下同一物质的保留时间相同；定量分析的依据是在一定浓度

范围内，浓度与峰面积(或峰高)成正比。

（六）数据记录与结果处理

确定样品内的物质，确定样品中甲苯的浓度。

1）定性分析实验记录

2）定量分析实验记录

丙酮浓度（ul/mL）峰面积（uV*s）
标样1501875145

标样2752876718

标样3100
3750275

标样41254607851
丙酮标样标准曲线

课后小结：

本次仪器分析实验高效液相色谱混合物的定量和定性测定，学生通过仪器分
析实验，基本了解高效液相色谱的性能及操作，掌握高效液相色谱分析的基本原
理，学习高效液相色谱混合物的定量和定性分析，为以后从事仪器设备开发和设
计工作，打下良好的基础。

示范教案(6.4激素调节)

●教学目标
知识目标
1.说出内分泌腺的特点、种类和激素的概念和主要种类。
2.举例说明人体激素参与生命活动的调节。
3.举例说明激素调节受神经系统的调控，人的生命活动主要受神经系统调节，但也受激
素调节的影响。
能力目标
1.运用资料分析的形成，获得研究激素功能的基本方法。
2.尝试设计对照实验。
情感目标
1.关爱和帮助激素分泌异常的患者。
2.关爱自己，积极健康向上。
●教学重点
1.内分泌腺的特点、种类和激素的概念和主要种类。
2.激素调节与神经调节的关系。
●教学难点
激素调节与神经调节的关系。
●教学方法
引导自学、比较法。
●课前准备
1.教师准备：有关激素分泌异常患者与正常人的对比图片。
2.学生准备：大小、发育程度相同的若干条蝌蚪。
●课时安排
1课时
●教学过程
［导入新课］
同学们由小学升入初中后，你是否注意到身边其他同学的变化，有的同学长高了许多、
嗓门变粗、喉结突出，具有了男子汉的风度。而女同学呢，则嗓音变细变尖、身材变得苗条
而具有曲线美，而且有时羞羞答答，更具女性味。那么这些生理上的变化究竟是由什么引起
的呢？今天，我们一起来学习：第四节，激素调节。
［讲授新课］
师：刚才我们所看到的男女之间的差异，实质是由我们体内的激素所促使的。除性激素
之外，人体内还有许多激素，它们在我们的一生中都具有重要的调节作用，调节着我们的生
长、发育、成熟和每日的新陈代谢，下边大家自己阅读材料，先来了解一下，我