一种检测苯硫酚的反应型荧光探针及其合成方法与应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111138431A(43)申请公布日2020.05.12(21)申请号202010032681.5(22)申请日2020.01.13(71)申请人商丘师范学院地址476000河南省商丘市平原中路55号(72)发明人郝远强张银堂董辉韩华博韦秀华朱旭瞿鹏徐茂田(74)专利代理机构郑州联科专利事务所(普通合伙)41104代理人杨海霞(51)Int.Cl.C07D471/06(2006.01)C09K11/06(2006.01)G01N21/64(2006.01)权利要求书1页说明书4页附图4页(54)发明名称一种检测苯硫酚的反应型荧光探针及其合成方法与应用(57)摘要本发明公开了一种检测苯硫酚的近红外荧光探针及其合成方法和应用，属于化学分析检测技术领域。本发明探针由8-(2,4-二硝基苯氧基)久洛尼定-9-甲醛与4-吡啶乙腈反应得到，具有如下结构：此探针对苯硫酚的响应基团为2,4-二硝基苯氧基，探针与苯硫酚作用会进一步发生分子内成环反应生成具有强荧光发射的香豆素类荧光分子，从而实现对苯硫酚的荧光检测。该探针分子对苯硫酚有高的选择性和灵敏度，检测范围为0–12μmol·L-1，检测限为33nmol·L-1。该探针可用于水体、土壤以及细胞内苯硫酚的检测。CN111138431ACN111138431A权利要求书1/1页1.一种检测苯硫酚的荧光分子探针，其特征在于，结构式如下：2.合成如权利要求1所述的检测苯硫酚的荧光分子探针的方法，其特征在于，通过如下方法实现：在有机溶剂中加入催化剂、化合物2、吡啶乙腈，在50-120℃条件下反应；反应完后减压旋干溶剂，得到的粗品经层析柱分离，得到目标产物探针分子1；所述有机溶剂选自乙腈、乙醇、二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮其中之一；所述催化剂选自哌啶、乙酸、乙酸钠、三乙胺其中之一。3.如权利要求1所述的检测苯硫酚的荧光分子探针的应用，其特征在于，采用荧光检测时，将本发明分子探针溶解于磷酸混合缓冲体系中，加入含不同浓度苯硫酚，分别测试其在545nm处的荧光强度，然后以溶液在545nm处荧光发射强度对苯硫酚的浓度作标准图；根据标准图，定量检测苯硫酚在待测溶液中的含量。4.如权利要求1所述的检测苯硫酚的荧光分子探针的应用，其特征在于，通过将细胞生物样品与本发明分子探针培育，利用荧光成像的方法对细胞生物样品中的苯硫酚进行定性检测。2CN111138431A说明书1/4页一种检测苯硫酚的反应型荧光探针及其合成方法与应用技术领域[0001]本发明属于化学分析检测技术领域，具体涉及一种检测苯硫酚的反应性荧光探针及其合方法和在检测苯硫酚方面的应用。背景技术[0002]苯硫酚(C6H5SH,PhSH)是一种具有高反应活性的芳基硫化物，在合成工业中有着广泛的应用，如磺胺类药物、农药及高分子的合成。但另一方面苯硫酚具有很高的毒性，呼吸及皮肤的摄入会导致各种病症，如呼吸困难、肌无力、中枢神经损伤甚至死亡。美国职业安全健康局限定了苯硫酚的工作环境最高浓度为0.1ppm。随着苯硫酚的大量工业使用排放及毒害作用，开发高灵敏、高选择检测苯硫酚的方法对环境检测与保护是非常必要的。[0003]基于分子探针的荧光法检法具有样品处理简洁、成本低廉及操作简便快速等优点，近年来得到了发展与利用。但目前用于检测苯硫酚的荧光探针分子还存在合成复杂、选择性及灵敏度不够高、水溶性差等问题(ZhangW.J.DyesandPigments2016,133,248；PagidiS.Langmuir2018,34,8170；GengaY.Sensors&Actuators:B.Chemical2018,273,1670.)，因此，亟待开发性能优良的苯硫酚检测探针去克服存在的上述问题。发明内容[0004]对于上述情况，本发明目的是提供一种易于制备、性能稳定、分析性能优良、水溶性好的新型荧光分子探针，并提供该探针的合成方法，还在此基础开发出对苯硫酚进行高选择性和高灵敏度的检测方法。[0005]为实现本发明目的，本发明利用苯硫酚具有较强的亲核反应特性，能与缺电子分子或基团发生反应，而2,4-二硝基苯醚能与苯硫酚发生特异性的反应，本专利采用2,4-二硝基苯醚为苯硫酚的响应基团。另一方面，香豆素类荧光分子具有稳定性好、发光强度高、水溶性好等优点，且反应活性位点与光谱性质可调控，本专利设计了具有香豆素母体结构的分子骨架，并以此合成了用于检测苯硫酚的荧光分子探针。[0006]所述检测苯硫酚的荧光分子探针，结构式如下：[0007][0008]其合成反应流程如下：3CN111138431A说明书2/4页[0009][0010]其合成方法具体如下：[0011]有机溶剂中，加入催化剂、化合物2、吡啶乙