一种新型组织冻存液.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105850982A(43)申请公布日2016.08.17(21)申请号201610283487.8(22)申请日2016.04.29(71)申请人绍兴市人民医院地址312000浙江省绍兴市中兴北路568号（昌安环岛西南侧）(72)发明人金科涛蓝欢荣陶锋黄黎明吕杰青景元明王伟胡耕远(74)专利代理机构北京三高永信知识产权代理有限责任公司11138代理人胡业勤(51)Int.Cl.A01N1/02(2006.01)权利要求书1页说明书7页(54)发明名称一种新型组织冻存液(57)摘要本发明属于与生物组织或细胞的保存相关的领域，涉及一种新型组织冻存液，具体涉及一种用于冻存肿瘤组织或者卵巢组织的液体。该本发明的冻存液含有如下成分：(1)LeibovitzL-15培养基；(2)胎牛血清；和(3)14-18％DMSO(dimethylsulfoxide，二甲基亚砜)，其中，LeibovitzL-15培养基可商购(Gibco)获得，或者本领域技术人员根据已报道的配方自行配制，优选地，DMSO的含量为14-16％，更优选为15％。对于本发明的新型冻存液，其中的胎牛血清的含量优选为14-18％，更优选为14-16％，最优选为15％。本发明的冻存液具有可冻存时间长、成瘤率高等优点，且配制方法简单，原料来源广泛。CN105850982ACN105850982A权利要求书1/1页1.用于冻存肿瘤组织的冻存液，该冻存液含有如下成分：(1)LeibovitzL-15培养基；(2)14-16％(V/V)胎牛血清；和(3)14-16％(V/V)二甲基亚砜。2.根据权利要求1所述的冻存液，其中所述胎牛血清的含量为15％。3.根据权利要求1或2所述的冻存液，其中所述二甲基亚砜的含量为15％。4.根据权利要求1-3中任一项所述的冻存液，其中所述的肿瘤组织为来自人的肿瘤组织。5.根据权利要求5所述的冻存液，其中所述的肿瘤组织选自结肠癌原发瘤、结肠癌淋巴转移瘤和结肠癌肝转移瘤。6.权利要求1-5中任一项所述的冻存液在冻存肿瘤组织中的用途。7.根据权利要求6所述的用途，其中所述肿瘤组织是来源于人的肿瘤组织。8.根据权利要求7的用途，其中所述肿瘤组织为结肠癌原发瘤、结肠癌淋巴转移瘤和结肠癌肝转移瘤。9.用于冻存肿瘤组织的试剂盒，其包含权利要求1-5中任一项所述的冻存液和使用说明书。10.根据权利要求9所述的试剂盒，其中所述的肿瘤组织为来源于人的结肠癌原发瘤、结肠癌淋巴转移瘤和结肠癌肝转移瘤。2CN105850982A说明书1/7页一种新型组织冻存液技术领域：[0001]本发明属于与生物组织或细胞的保存相关的领域，涉及一种用于冻存肿瘤组织或者卵巢组织的液体。背景技术：[0002]在药物开发和特异性治疗途径或用药等的开发过程中，需要对生物组织(例如通过手术切除或通过穿刺获得的生物组织，特别是肿瘤组织)进行保存，以用于后续的治疗、检测或科学研究等工作。例如：中国专利申请CN201510261052.9涉及一种诱导多能干细胞冻存液、其应用及冻存方法；CN201410676389.1涉及一种人脂肪间充质干细胞冻存液；CN201510443887.6涉及干细胞冻存液及干细胞冻存方法；CN201510037248.X涉及一种神经干细胞的冻存液及其使用方法；CN201510083493.4涉及一种外周血单个核细胞无血清冻存液及冻存方法；CN201510168081.0涉及一种CIK细胞冻存液及冻存方法；CN201510716232.1涉及一种脐带间充质干细胞的冻存保护液及冻存方法。[0003]肿瘤动物模型一直以来是抗肿瘤药物临床前疗效预测和可能的毒性评价的有效工具。促使一个实验室候选药物进入临床试验的前提是来自动物模型的研究数据能够预测该药物在临床应用时的疗效。当药物研发人员开发一个新型药物时，摆在他们面前的其中一个最大的障碍是从动物实验中获得的药敏和毒理数据有时并不能完全验证在患者身上。目前用于药物筛选的肿瘤模型基本采用的是将成熟的肿瘤细胞系接种于免疫缺陷小鼠获得的。这种模型已经用于抗肿瘤新药的筛选达数十年之久。虽然这种模型在揭示肿瘤转移的细胞和分子机制中显示出其优点，但是在预测抗肿瘤药物的临床治疗敏感性时，这种模型的价值却非常有限。经过体外几十代的培养，恶性肿瘤细胞已经呈现出高度未分化的状态，细胞系在体外培养的选择压力下表现出均一的组织学特征，其生物学特性和分子特征已经和原发肿瘤相差甚远。而且体外培养的细胞系缺乏肿瘤的间质成分，而这种间质成分被认为在肿瘤转移的病理过程中起到很关键的作用。鉴于此，很多研究小组开始尝试建立一种直接接种来源于肿瘤患者新鲜肿瘤组织(patient-derivedtumortiss