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本发明公开了一种利用木糖及含木糖水解液发酵生产1,4?丁二胺的方法,属于基因工程技术领域。本发明通过采用大肠杆菌和钝齿棒杆菌之间的穿梭质粒pEC?XK99E,将来源于EscherichiacoliK?12的木糖异构酶和木酮糖激酶编码基因簇在先前构建的1,4?丁二胺高产菌株PC0中表达。摇瓶发酵结果表明,原始菌PC0不具有代谢利用木糖的能力,而重组钝齿棒杆菌具有此能力,可以直接利用木糖及含木糖水解液直接进行1,4?丁二胺的生产。最终在5?L发酵罐72h发酵可以积累33.4g·L?11,4?丁二胺。本发明方法生产1,4?丁二胺,具有效率高、副产物L?精氨酸、胍基丁胺和其他杂酸含量低的优点,后期对于产物1,4?丁二胺的分离纯化更加容易。